冯艳连2009-7-25大肠杆菌的实验方案

2009-7-25的工作总结
  大肠杆菌能导致的疾病有：
  1、肠道外感染　多为内源性感染，以泌尿系感染为主，如尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎。也可引起腹膜炎、胆囊炎、阑尾炎等。婴儿、年老体弱、慢性消耗性疾病、大面积烧伤患者，大肠杆菌可侵入血流，引起败血症。早产儿，尤其是生后30天内的新生儿，易患大肠杆菌性脑膜炎；
  2、急性腹泻
  　　某些血清型大肠杆菌能引起人类腹泻。其中肠产毒性大肠杆菌会引起婴幼儿和旅游者腹泻，出现轻度水泻，也可呈严重的霍乱样症状。腹泻常为自限性，一般2～3天即愈，营养不良者可达数周，也可反复发作。肠致病性大肠杆菌是婴儿腹泻的主要病原菌，有高度传染性，严重者可致死。细菌侵入肠道后，主要在十二指肠、空肠和回肠上段大量繁殖。此外，肠出血性大肠杆菌会引起散发性或暴发性出血性结肠炎，可产生志贺氏毒素样细胞毒素。
  　　举例
  　　病原体：大肠杆菌O157 : H7是大肠杆菌的其中一个类型，该种病菌常见于牛只等温血动物的肠内。这一型的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素，并可能导致肠管出现严重症状，如带血腹泻。
  病征：患者可能出现各种症状，包括严重的水泻、带血腹泻、发烧、腹绞痛及呕吐。情况严重时更可能并发急性肾病。5岁以下的儿童出现该等并发症的风险较高。若治疗不当，可能会致命。
  大肠杆菌的传播途径
  　该种疾病可通过饮用受污染的水或进食未熟透的食物(特别是免治牛肉、汉堡扒及烤牛肉)而感染。饮用或进食未经消毒的奶类、芝士、蔬菜、果汁及乳酪而染病的个案亦有发现。此外，若个人卫生欠佳，亦可能会通过人传人的途径，或经进食受粪便污染的食物而感染该种病菌。 大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌，周身鞭毛，能运动，无芽孢。主要生活在大肠内。　
  1、大肠杆菌是细菌，属于原核生物；具有由肽聚糖组成的细胞壁，只含有核糖体简单的细胞器，没有细胞核有拟核；细胞质中的质粒常用作基因工程中的运载体。
  　　2、大肠杆菌的代谢类型是异养兼性厌氧型。
  　　3、人体与大肠杆菌的关系：在不致病的情况下（正常状况下），可认为是互利共生（一般高中阶段认为是这种关系）；在致病的情况下，可认为是寄生。
  　　4、培养基中加入伊红美蓝遇大肠杆菌，菌落呈深紫色，并有金属光泽，可鉴别大肠杆菌是否存在。
  　　5、大肠杆菌在生物技术中的应用： 大肠杆菌作为外源基因表达的宿主，遗传背景清楚，技术操作简单，培养条件简单，大规模发酵经济,倍受遗传工程专家的重视。目前大肠杆菌是应用最广泛，最成功的表达体系，常做高效表达的首选体系。
  　　6、大肠杆菌在生态系统中的地位，假如它生活在大肠内，属于消费者，假如生活在体外则属于分解者
  　　真核基因在大肠杆菌中表达,必须有合适的表达载体(Vector),常用载体:pBV220,pET系统
  　　目的基因在大肠杆菌中表达的情况:
  　　大肠杆菌更适合原核基因的表达,外源基因表达产量与单位体积产量是正相相关的,而单位体积产量与细胞浓度和每个细胞平均表达产量呈正相相关.细胞浓度与生长速率,外源基因拷贝数和表达 产物产量之间存在动态平衡,单个细胞的产量又与外源基因拷贝数,基因表达效率,表达产物的稳定性和细胞代谢负荷等因素有关。
  1. 医院污水的性质
  　　医院污水来源及成分复杂，含有病原性微生物、有毒、有害的物理化学污染物和放射性污染等，具有空间污染、急性传染和潜伏性传染等特征，不经有效处理会成为一条疫病扩散的重要途径和严重污染环境：
  　　1）医院污水受到粪便、传染性细菌和病毒等病原性微生物污染，具有传染性，可以诱发疾病或造成伤害；
  　　2）医院污水中含有酸、碱、悬浮固体、BOD、COD和动植物油等有毒、有害物质；
  2. 医院污水处理原则：
  　　1）全过程控制原则。对医院污水产生、处理、排放的全过程进行控制。
  　　2）减量化原则。严格医院内部卫生安全管理体系，在污水和污物发生源处进行严格控制和分离，医院内生活污水与病区污水分别收集，即源头控制、清污分流。严禁将医院的污水和污物随意弃置排入下水道。
  　　3）就地处理原则。为防止医院污水输送过程中的污染与危害，在医院必须就地处理。
  　　4）分类指导原则。根据医院性质、规模、污水排放去向和地区差异对医院污水处理进行分类指导。
  　　5）达标与风险控制相结合原则。全面考虑综合性医院和传染病医院污水达标排放的基本要求，同时加强风险控制意识，从工艺技术、工程建设和监督管理等方面提高应对突发性事件的能力。
  　　6）生态安全原则。有效去除污水中有毒有害物质，减少处理过程中消毒副产物产生和控制出水中过高余氯，保护生态环境安全。
  3. 医院污水处理工艺：
  根据医院的规模、性质和处理污水排放去向，进行工艺选择。主要采用的工艺有三种：加强处理效果的一级处理、二级处理和简易生化处理。目前，医院污水处理一般采取工程设计、建设及验收的操作与管理办法，其处理设施需经过一定时间的试运行，处理效果才能达到预期目的。化学法治理需经一个月的试运行，二级生化法处理需经三个月以上的试运行。因此，小型综合医院（主要包括城市卫生服务社区、乡镇卫生院）亟需寻求一种资金投入较少、建设周期较短、安全稳妥达标的技术方案（设备）。
  医院粪大肠杆菌的污水排放标准
  　第二类污染物最高允许排放浓度(1997年12月31日之前建设的单位)单位：mg/L
  　　25 粪大肠菌群数 医院*、兽医院及医疗机构含病原体污水 500个/L 1000个/L 5000个/L
  　　传染病、结核病医院污水 100个/L 500个/L 1000个/L
  　　　(采用氯化消毒的医院污水) 医院*、兽医院及医疗机构含病原体污水 3(接触时间 ≥1h) >2(接触时间≥1h)
  　　传染病、结核病医院污水 6.5(接触时间≥1.5h >5(接触时间≥1.5h)
  　　注： * 指50个床位以上的医院。
  　　** 加氯消毒后须进行脱氯处理，达到本标准
  　　生物性污染 biotic pollution
  　　是指病原微生物排入水体后，直接成间接地使人感染或传染各种疾病。衡量指标主要有大肠菌类指数、细菌总数等。
  生活污水，特别是医院污水和某些工业废水污染水体后，往往可以带入一些病原微生物。例如某些原来存在于人畜肠道中的病原细菌，如伤寒、副伤寒、霍乱细菌等都可以通过人畜粪便的污染而进入水体，随水流动而传播。一些病毒，如肝炎病毒、腺病毒等也常在污染水中发现。某些寄生虫病，如阿米巴痢疾、血吸虫病、钩端螺旋体病等也可通过水进行传播。防止病原微生物对水体的污染也是保护环境，保障人体健康的一大课题。
  大肠杆菌的数量是一个很重要的水质标准。（溶解氧及大肠杆菌是两项可反映海水水质的重要参数。）
  污水及食品中所含的细菌有：
  细菌大肠杆菌        ；金黄色葡萄球菌        白色葡萄球菌        荧光假单孢菌        鼠伤寒沙门氏菌        福氏痢疾杆菌        霍乱弧菌        大肠杆菌        芽孢 枯草杆菌变种芽孢
  枯草杆菌变种芽孢        病毒乙肝表面抗原        甲肝表面抗原        乙肝表面抗原        甲型流感病毒        脊髓灰质炎病毒        大肠杆菌噬菌体        猿伦状病毒，        人伦状病毒
  艾滋病毒（HIV） 血清中        真菌 杂色曲霉菌        腊叶枝孢霉菌        黑青霉菌        桔青霉菌，        尖镰孢霉菌        青霉菌        毛霉菌        黑曲霉菌
  原虫， 兰氏甲第鞭毛虫        鼠型甲第鞭毛虫        　虫卵囊        伤寒、副伤寒、霍乱细菌        肝炎病毒、腺病毒        寄生虫病，如阿米巴痢疾、血吸虫病、钩端螺旋                        
  为什么要用大肠杆菌检测水质污染的程度？
  大肠杆菌就是大肠里一种寄生细菌，在人畜排泄物中含量也多，所以在水净化和污水处理领域，大肠杆菌很早就被选作水污染程度的指示性物种，其测量标准为大肠菌群指数。利用大肠杆菌作为标准的主要理由在于人粪便中大肠菌群的数目远高于致病菌（如可引起伤寒的伤寒杆菌，学名Salmonella typhi），此外大肠杆菌多数情况下无害。
  测定大肠杆菌的目的：是因为大肠杆菌作为水污染程度的指示性物种的标志，大肠杆菌的含量高低表明了水污染的程度。
  水上等离子的作用：可消除水体恶臭，杀菌，除重金属，，降低COD，能起到消毒保鲜的作用。
  ⑴目的：了解等离子对生活污水及医院污水的影响。
  方法：在水上等离子处理生活污水及医院污水前后取水样测定污水中的总细菌数，及大肠杆菌的含量。
  结果：
  项目        大肠杆菌含量、
  个/L        总细菌数个/L               
  处理前水样                                
  处理后水样                                
                                 
                                 
  
  结论：

要不我崇拜你?行吗?